血液分析儀試劑的工作原理

2021072915:48


試劑作用原理及其對ⅰ、ⅲ類hematology analyzer檢測結果的影響

1、稀釋液

1.1稀釋液作用原理

A)稀釋血細胞,防止血細胞聚集和粘附;

b)保持ph、ρ、OS等理化指標穩定。:根據不同的儀器設計理念,稀釋劑的理化指標存在較大差異。不同儀器用電阻法原理測量樣品時(圖1),設定的脈衝信號閾值不一樣(稀釋劑分為高滲、等滲和低滲),所以同一樣品在不同儀器上的直方圖fl不同。以紅細胞直方圖為例,靈敏度高的儀器可以用理化指標穩定、範圍準確的稀釋劑將橫坐標控制在60-150fl,否則橫坐標會延伸到30-200fl甚至更寬,直方圖會向左或向右移動。

1.2稀釋劑對檢測結果的影響

稀釋劑是用於hematology analyzer各測定步驟的一種試劑。稀釋劑理化指標不合格。常見的影響是血小板背景高,白細胞分類不好,hct 漂移(hct 是檢測試劑質量的重要指標之一) ,因為 mcv、 mch、 mchc 是計算參數,所以 mcv、 mch、 mchc 的檢測結果也會受到嚴重影響。

2、溶血素

2.1溶血素作用原理

a)溶解紅細胞便於白細胞計數:在電阻法計數的三類hematology analyzer中,紅細胞和白細胞的體積重疊,紅細胞數量是白細胞的近1000倍。因此,必須加入溶血素,用電阻法計數白細胞,才能準確計數白細胞。

B)作用於白細胞膜,可使白細胞膜穿孔,胞漿丟失(查核) ,後白細胞胞漿丟失,因為只有細胞核、最小的淋巴細胞、單核細胞稍大,而中性粒細胞以大細胞的形式存在。這樣,在直方圖中,白細胞在最左邊的區域是淋巴細胞,在中間的區域是單核細胞,在最右邊的區域是粒細胞

c)檢測血液中的血紅蛋白濃度:

目前,國際血液標準委員會(ICSH)推薦的檢測血液中血紅蛋白的參考方法是氰化鐵法(HiCN),因此大多數hematology analyzer採用氰化鐵法檢測血紅蛋白。

近年來,一些hematology analyzer為了降低溶血素的毒性,避免檢測出含氰血紅蛋白衍生物後的浪費處理,使用了非氰化溶血素。結果表明,該衍生物與吸收光譜相似,實驗結果的準確度、 cv 值和線性度均達到含氰溶血素水平,保證了實驗質量,避免了污染。

2.2溶血素對試驗結果的影響

溶血素試劑的質量主要體現在吸收峰波長、吸光度、 ph 值和空白值等方面。吸收峰波長和吸光度不能滿足要求,導致比色法測定血紅蛋白的偏差。如果溶血素的溶血不完全,紅細胞就不會完全被破壞,一些紅細胞就會被算作白細胞,導致白細胞數量過高。同時,紅細胞釋放的血紅蛋白反應不完全,導致比色法測定血紅蛋白濃度的結果產生偏差。另一方面,如果溶血速度過快,吸收波長和吸收度會在測量血紅蛋白的時間之前開始漂移,也會導致血紅蛋白和白細胞計數的變形。

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